以下文章来源于《兽医生物制品学》（第二版）
侵删
中国农业出版社P-页
作者：陈小云王忠田
细胞与细胞系
一、兽医生物制品生产中常用的细胞系
(一)兽医生物制品生产用动物细胞的发展历程
1.原代细胞时期国际上最早的生物制品法规定，只有从正常组织分离的原代细胞，如鸡胚成纤维细胞、猴肾细胞等才能用来生产生物制品。年Enders最先用原代胚胎组织细胞进行脊髓灰质炎灭活疫苗的生产，开创了动物细胞培养用于生物制药的先河。直到今天，我国生产的许多兽医生物制品，依然是采用原代细胞进行生产，其中应用最普遍的原代细胞是鸡胚成纤维细胞。
2.传代细胞系时期许多可连续传代的细胞系建立于20世纪50年代。与原代细胞相比，传代细胞系的优点是生长快速，细胞类型均一，比较便宜，不使用动物也就没有伴随的污染问题等。然而，此后的数十年间，所有生产工艺中都无一例外地采用原代细胞。其原因是传代细胞系在生物学特性上与肿瘤细胞有许多相似之处，有的是从肿瘤细胞衍生而来，它们可能含有可传播的致癌因子或其本身就具有某种程度的潜在致瘤性。由于缺乏有效的科学手段来排除这种可能，因而传代细胞系未被允许用于生产。
近30年来，由于细胞生物学、病毒学和分子遗传学的发展，许多生命现象得以阐释，这使人们对肿瘤发生的相关因素及成分有了相当深入的了解，同时也否认了异倍体细胞致癌的假想。在传代细胞中发现了一些潜在致癌因子，如活化癌基因、内源性致癌病毒(如反转录病毒)、转化蛋白(如T抗原)等。要确认传代细胞系缺乏所有的潜在致癌因子，特别是致癌病毒是相当困难的。但随着纯化技术的发展和检测手段的进步，人们有方法证明在成品中没有不可接受水平的DNA和蛋白质及致癌因子。这最终导致了20世纪80年代传代细胞系应用于人用生物制品的生产。目前，传代细胞系已被广泛用于人用治疗性药物的生产，并且西方发达国家在兽医生物制品的生产中，已经越来越多地采用传代细胞系。我国最初主要是将传代细胞系应用于口蹄疫灭活疫苗等的大规模生产，近年来也逐渐开始应用传代细胞系生产兽用活疫苗。
(二)细胞基质及其种类
细胞基质是指可用于生物制品生产和检定的所有动物连续传代细胞系及原代细胞。
1.原代细胞原代细胞是将直接取自于动物的组织、器官，粉碎、消化后获得的一种细胞。一般来说，1g组织约有10^9个细胞，但一种组织中常由多种细胞组成，在实际操作中，只能得到其中的一部分细胞。因此，用原代细胞来生产兽医生物制品常需要大量的动物组织，费钱费力，以往生产中用得最多的是鸡胚成纤维细胞、原代兔肾细胞等。
2.传代细胞系传代细胞系，或称转化细胞系，是通过正常细胞转化而来，分化不成熟的、获得了无限增殖能力的一种细胞株。常常由于染色体的断裂而变成异倍体，并失去正常细胞的特点。
传代细胞在长期培养中，由于自发或人为方法(如病毒感染或使用化学试剂)可获得无限增殖能力。此外，直接从肿瘤组织建立的细胞系也是转化细胞系。由于转化的细胞具有无限的生命力，而且倍增时间常常较短，对培养条件和生长因子要求较低，故适用于大规模工业化生产的需要。近年来用于生产的细胞，如BHK-21细胞和Vero细胞都是转化细胞。
传代细胞的优点是能使用种子库系统生产，因此可加以全面鉴定和标准化控制。其最大的特点是可以利用微载体生物反应器进行大规模生产，对培养基及牛血清要求不高；其缺点是尚未在理论上明确证实其不具有致肿瘤的危险。
(三)兽医生物制品生产用动物传代细胞的特性
目前常用于兽医生物制品生产的动物传代细胞种类包括BHK-21、Marc-、Vero、MD-CK等10余种细胞系(表8-12)。
1.BHK-21细胞该细胞由英国Glasgow大学的Macpherson等于年3月从5只无性别的1日龄仓鼠幼鼠的肾脏中分离，经84d连续培养而得，期间只有8d时间作冻存保存。目前广泛应用的是年用单细胞分离的方法经13次克隆的细胞。
BHK-21细胞是成纤维样细胞(图8-3)。取50个细胞作染色体频率分布检测，结果显示核型为2n=44。它是假二倍体细胞系，四倍体的发生率为4％。多数分析细胞的核型为44、XY、-6、-15、6q+、15q+，大多数细胞有6q+和15q+标识。偶尔可见单染色体或三染色体的情况。
BHK-21细胞自问世至今，已成为制备口蹄疫灭活疫苗所需病毒抗原的理想细胞培养系，现广泛应用于口蹄疫疫苗生产；另外，其还可用于生产兽用狂犬病活疫苗和灭活疫苗等。同时，该细胞还经常用作检验用细胞，如世界动物卫生组织(OIE)指定该细胞用于狂犬病的常规诊断(见
