“今年三月，来自南加州大学的Si-YiChen联合美国生命测序有限公司（LifeSeqLimitedCorp）的XueF.Huang在NatureCommunications上发文，报道了一种利用共表达PD-L1抑制剂和GM-CSF的工程溶瘤病毒激活肿瘤新抗原特异性T细胞免疫反应的新方法，研究题为"AnengineeredoncolyticvirusexpressingPD-L1inhibitorsactivatestumorneoantigen-specificTcellresponses”

文中指出，肿瘤新抗原可以从遗传突变的表达中重新获得，并以主要的组织相容性复合物（MHC）的形式出现在肿瘤细胞上，且针对新抗原的内源性T细胞应答可以在癌症患者中自然激活。然而，只有少量在肿瘤中表达的非同义突变可以作为新抗原被适当地呈现出来，并且免疫检查点分子（例如PD-1/PD-L1）会抑制抗肿瘤T细胞反应。因此免疫检查站封锁可有效增强针对肿瘤新抗原的内源性T细胞应答，并促进晚期恶性肿瘤患者的持久免疫应答，包括对各种类型的癌症（如黑素瘤，转移性肺癌，肾癌和膀胱癌）的完全应答。

然而，大多数癌症患者对PD-1/PD-L1阻滞有抵抗力。治疗失败的原因之一是所谓的“冷”肿瘤，其大多具有较差的MHC表现以及较弱的吸引T细胞浸润的能力。鉴于大多数肿瘤未能自发地激活针对肿瘤突变新抗原的T细胞反应并且对PD-1阻断具有抵抗力，因此提高对PD-1阻断疗法的反应率仍然是一项重要的挑战。

此外，溶瘤病毒具有提供更简单的原位疫苗接种方法的潜力，可以促使局部区域免疫激活，通过免疫原性导致肿瘤细胞死亡，或者通过突变的新抗原释放和呈递以及免疫抑制性肿瘤微环境的改变来激活T细胞应答，从而消灭肿瘤。

VV-iPDL1/GM

图片来自———NatureCommunications

在这项研究中，研究人员构建了共表达PD-L1抑制剂和GMCSF的工程溶瘤牛痘病毒（（VV）-iPDL1/GM）。研究人员发现，这种工程溶瘤病毒能够通过病毒复制，GM-CSF刺激和对肿瘤细胞和免疫细胞的PD-L1抑制的协同作用来激活新抗原特异性T细胞应答，从而提供一种新型溶瘤免疫疗法。

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这项研究的结果表明，共表达PD-L1抑制剂和GM-CSF（VV-iPDL1/GM）的溶瘤病毒能够产生PD-L1抑制剂并以自分泌和旁分泌的方式与PD-L1+肿瘤细胞和免疫细胞系统结合。

图片来源：NatureCommunications

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流式结果显示，VV-iPDL1/GM治疗的肿瘤的CD+DC中IL-12，CXCL9和CXCL10的表达升高。而且研究人员观察到MC38肿瘤细胞在体外与iPDL1共培养时，从经VV-iPDL1/GM处理的MC38肿瘤细胞悬液分离的PD-1+CD8+T细胞对照IgG来看，IFN-γ+阳性率更高，说明其在抗肿瘤细胞免疫抑制中的效果更好。这些数据表明，VV-iPDL1/GM注射会增强肿瘤浸润性DC细胞的成熟和新抗原的呈递。

增强针对原发性肿瘤的抗肿瘤活性

研究人员使用萤光素酶阳性的B16-F10黑色素瘤建立小鼠模型，并通过瘤内注射VV-RFP、VV-GM、VV-iPDL1、GM和PBS，来评估VV-iPDL1/GM的抗肿瘤活性。尽管瘤内注射VV-RFP或VV-GM可以显著抑制肿瘤生长，但生物发光监测和卡尺测量均显示VV-iPDL1/GM在抑制B16-F10肿瘤方面更有效。

增强针对未治疗的远处肿瘤的抗肿瘤活性

然后，研究人员测试了在肿瘤内注射VV-iPDL1/GM是否能够引起全身性抗肿瘤反应。他们用VV-RFP、VV-GM、VV-iPDL1/GM和PBS治疗携带B16-F10肿瘤的C57BL/6小鼠组，在对侧胁腹接种荧光素酶阳性的B16-F10肿瘤。通过生物发光成像，卡尺测量和生存曲线可以看出，VV-iPDL1/GM在抑制再发性同源B16-F10肿瘤的生长方面更有效。此外，与VV-GM或VV-RFP的肿瘤内注射相比，VViPDL1/GM的肿瘤内注射在抑制再发性同源Py肿瘤和MC38肿瘤的生长上也更有力。

综上所述，瘤内注射VV-iPDL1/GM可以促进T细胞特异性地识别肿瘤细胞，并通过分泌的PD-L1抑制剂解除肿瘤微环境中的免疫抑制，在肿瘤细胞上呈递新抗原，从而引发原位肿瘤和远端肿瘤的免疫反应。

这种改造后的溶瘤病毒不仅可以单用，也可以与免疫检查点抑制剂，靶向疗法和化学疗法联合治疗癌症患者，特别是对PD-1/PD-L1阻断疗法产生耐药的患者，为晚期难治复发癌症患者带来福音。

参考资料：

Wang，G.，Kang，X.，Chen，K.S.etal.AnengineeredoncolyticvirusexpressingPD-L1inhibitorsactivatestumorneoantigen-specificTcellresponses.